Бруцелла, антитела в реакции агглютинации с бруцеллезным антигеном в пробирках (Anti-Brucella spp., реакция Райта), полуколичественное определение

Бруцеллез – это инфекционное зоонозное заболевание, характеризующееся лимфаденопатией, длительной лихорадкой, поражением опорно-двигательной, сердечно-сосудистой, нервной и других систем, а также высокой частотой хронизации. Возбудителем заболевания являются микроорганизмы Brucella spp. Они представляют собой грамотрицательные бактерии шаровидной или овоидной формы, обладают высокой способностью к инвазии и внутриклеточному паразитированию. Патогенными для человека являются следующие виды бруцелл: B. melitensis, B. abortus, B. suis, B. canis, B. ceti. При этом на долю B. melitensis приходится подавляющее большинство случаев заражения. Источником инфекции является крупный и мелкий рогатый скот, свиньи. Возбудитель инфекции может попадать в организм человека при употреблении мяса, сырых молочных продуктов (молоко, сыр) – алиментарный путь передачи. Также возможно заражение при непосредственном контакте с инфицированными тканями животных, их выделениями у ветеринаров, работников мясной промышленности, животноводства, сотрудников микробиологических лабораторий. Описаны случаи передачи микроорганизма от человека к человеку, в том числе случаи заражения младенцев при употреблении грудного молока больной матери.

Инкубационный период при бруцеллезе – 7-30 дней. Заболевание имеет разнообразные клинические проявления с поражением множества органов и систем. Различают острую, подострую и хроническую форму бруцеллеза. Встречается латентная форма заболевания с отсутствием выраженной клинической симптоматики или стертым течением инфекции.

Острая и подострая формы бруцеллеза характеризуются слабостью, головной болью, длительной лихорадкой с температурой 39-40 °С и выше, сопровождающейся ознобами и проливными потами. Отмечается лимфаденопатия, увеличение и болезненность при пальпации печени и селезенки, поражение нервной системы (раздражительность, явления менингизма, менингит), поражение сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательной системы в виде артралгий. Хроническая форма заболевания является распространенной и характеризуется слабыми признаками интоксикации, рецидивирующим течением с периодами обострений. Отмечается поражение опорно-двигательного аппарата в виде артритов, периоститов, перихондритов крупных суставов с формированием ограничения их подвижности, анкилозов. Также наблюдаются миозиты, фиброзиты, целлюлиты. Поражается центральная и периферическая нервные системы в виде радикулитов, невралгий, невритов, неврозов. В патологический процесс могут вовлекаться сердечно-сосудистая система с развитием васкулитов, миокардита, эндокардита; урогенитальный тракт; органы эндокринной системы. Встречается также локализованная форма бруцеллеза. Она отмечается в 20-40 % случаев инфекции и характеризуется изолированным поражением какого-либо органа, например органов мочеполовой, нервной системы, сердца, а также поражение сустава. Как правило, локализованный бруцеллез – это последствие не распознанной ранее острой формы заболевания.

Диагностика бруцеллеза основана на эпидемиологических, клинических данных и результатах изменений лабораторных показателей. Следует отметить, что диагностика бруцеллеза затруднена из-за того, что заболевание может протекать в бессимптомной, хронической и локализованной форме. Известны бактериологический, серологический, аллергологический, а также определение генетического материала возбудителя методом полимеразной цепной реакции.

Серологическая лабораторная диагностика бруцеллеза заключается в выявлении специфических антител против антигенов возбудителя Brucella spp. Данный метод обладает высокими показателями диагностической чувствительности и быстротой получения результата. На 6-7-й день от начала заболевания начинают синтезироваться специфические антитела класса IgM. На второй неделе заболевания преобладает синтез антител класса IgG, достигая максимального уровня, а затем в течение длительного времени сохраняясь в циркулирующей крови. Титры обоих классов антител непрерывно нарастают, достигая максимальных значений в течение четырех недель от начала инфицирования. Диагностически значимым является нарастание титра специфических антител не менее чем в четыре раза в парных сыворотках, взятых в первые дни болезни и через две недели от ее начала в свежем образце крови. Определение антител к Brucella spp. также рекомендуется для оценки эффективности проводимой терапии. При положительных эффектах лечения отмечается снижения уровня антител, в то время как сохранение высоких титров свидетельствует о неэффективности терапии.

Для чего используется исследование?

Для лабораторной серологической диагностики бруцеллеза;
для диагностики острой, подострой, хронической форм бруцеллеза;
для оценки эффективности проводимой терапии.
Когда назначается исследование?

При клинических проявлениях острой и подострой форм бруцеллеза: слабость, головная боль, длительная лихорадка с температурой 39-40 °С и выше с ознобами, лимфаденопатии, гепатоспленомегалия, артралгии, артриты, поражения сердечно-сосудистой, нервной систем;
при клинических проявлениях хронической формы бруцеллеза: интоксикация, артриты, артралгии, миалгии, миозиты, фиброзиты, целлюлиты, радикулиты, невралгии, васкулитов, миокардиты, эндокардиты;
при симптомах изолированных поражений органов урогенитального тракта, нервной системы, сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательной системы, особенно в группе лиц с возможным профессиональным инфицированием (ветеринары, работники мясной промышленности, животноводства, сотрудники микробиологических лабораторий), в эндемичных по бруцеллезу районах.

За 4 часа до забора крови запрещается принимать пищу, допускается пить только бутилированную негазированную воду; за 1-2 дня рекомендуется снизить интенсивность физических нагрузок; за 48 час. исключить курение и употребление алкогольных напитков. За 30 минут исключить курение.

Референсные значения

Диагностический титр: 1:100.

Причины повышения:

бруцеллез;
острая, подострая, хроническая форма бруцеллеза;
бруцеллез, протекающий в виде локализованных форм;
ложноположительные результаты.
Причины понижения:

отсутствие бруцеллеза;
отсутствие или снижение иммунного ответа;
ранние сроки инфицирования;
проведение исследования на поздних сроках от момента возможного инфицирования, когда в крови отсутствуют антитела.
Что может влиять на результат?

Клинический период и форма заболевания;
особенности иммунного ответа у новорождённых детей, пожилых людей и лиц с патологией иммунной системы.
Важные замечания

При серологическом исследовании чаще всего выявляют антитела к общему для многих микроорганизмов липополигосахариду, компоненту клеточной стенки бактерий. Могут отмечаться ложноположительные результаты при наличии инфекции Yersinia enterocolitica O:9, Salmonella urbana группа N, Vibrio cholerae, Francisella tularensis, Escherichia coli O:157, Stenotrophomonas maltophilia и некоторых других микроорганизмов.
Может быть рекомендовано определение генетического материала возбудителя методом полимеразной цепной реакции.