Хламидия (Chlamydia trachomatis), количественное определение ДНК

Chlamydia trachomatis (хламидия трахоматис) – бактерия, внутриклеточный паразит, возбудитель нескольких заболеваний человека. В частности, некоторые серовары этого вида вызывают трахому и венерическую лимфогранулему. В России наиболее распространена хламидийная инфекция мочеполовой системы (урогенитальный хламидиоз). Она передается половым путем, а также от матери к ребенку при родах. Возможен и контактно-бытовой путь передачи. Chlamydia trachomatis – самый частый возбудитель негонококкового уретрита. У женщин хламидиоз встречается чаще, чем у мужчин.

Инкубационный период составляет от 2 недель до 1 месяца. Часто (примерно в половине случаев) хламидиоз протекает бессимптомно.

Начальные симптомы инфекции: жжение и боль при мочеиспускании, слизистые выделения, помутнение мочи, слабость, немного повышенная температура, у мужчин – воспаление мочеиспускательного канала, которое длится долгое время, у женщин – слизистые или гнойные выделения из влагалища. В дальнейшем могут возникать различные осложнения: эпидидимит, эндометрит, конъюнктивит, артрит и др.

Считается, что хламидийная инфекция опасна при беременности, так как может привести к преждевременным родам, выкидышу, сниженному весу новорождённых и даже гибели плода.

Кроме того, новорождённый ребенок иногда заражается хламидиозом от матери при прохождении через родовой канал, из-за чего у него развивается конъюнктивит либо пневмония.

Для анализа на хламидии и диагностики хламидиоза применяют серологические методы (например, ИФА), посев хламидий, а также выявление ДНК бактерий (например, ПЦР).

У серологических методов и посева есть ряд ограничений, так что тесты на основе ПЦР считаются самыми удобными и чувствительными.

ПЦР в реальном времени (РТ-ПЦР) – это лабораторный метод, который позволяет найти в пробе ДНК возбудителя: если в образце присутствует Chlamydia trachomatis, то реал-тайм ПЦР обнаружит ДНК этой бактерии. Принцип заключается в том, что ДНК возбудителя, которого хотят выявить, много раз копируется с помощью специальных ферментов (ДНК-полимераз). Обычно проходит несколько десятков циклов и в ходе каждого нужная ДНК удваивается. В результате количество исследуемой ДНК увеличивается в миллионы раз и ее можно детектировать с помощью флуоресцентного красителя.

При ПЦР в реальном времени количество ДНК выявляется в процессе копирования, после каждого цикла. Но при этом с помощью РТ-ПЦР нельзя различить формы инфекции (например, свежеприобретенное или давнее заражение).

Для чего используется ПЦР-анализ на хламидии?

Для диагностики инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis (хламидия трахоматис), и мониторинга ее лечения.
Когда назначается исследование?

Для диагностики урогенитального хламидиоза при следующих симптамах:
жжение и боль при мочеиспускании,
покраснение в области наружного отверстия уретры у мужчин,
слизистые выделения из половых путей,
помутнение мочи,
слабость,
субфебрильная температура.
Для исключения хламидиоза при планировании беременности (и во время нее).
После случайных половых контактов.
Если половой партнер заражен хламидиями.

Требования к подготовке перед взятием биологического материала
Не следует брать материал для исследования ранее, чем через 24 часа после полового акта.
Не следует брать материал для исследования ранее, чем через 24 часа после УЗИ с
применением вагинального датчика.
Не следует брать материал для исследования ранее, чем через 24-48 часов после
кольпоскопии.
Не рекомендуется брать материал во время менструального кровотечения.
Не рекомендуется выполнять спринцевание накануне и в день взятия биологического
материала.
Рекомендуется брать материал не ранее, чем через 10 дней после применения
антибактериальных препаратов и местных антисептиков, и не ранее, чем через 1 месяц после
применения антибиотиков перорально.
Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла,
не ранее 5-ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до
предполагаемого начала менструации. При наличии выраженных симптомов воспаления взятие
материала проводится в день обращения.
Пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-3 часов перед взятием
соскоба из уретры (женщинам – 3 часа, мужчинам – 1,5-2 часа). Правила сбора мочи:1. Перед сбором мочи провести тщательную гигиеническую обработку наружных
половых органов, чтобы в мочу не попали выделения из них.
2. Контейнер для сбора мочи следует заполнить на 1/3-1/2 объема (для
исследования необходимо не менее 10 мл мочи).
3. Плотно закрыть контейнер крышкой для предотвращения вытекания мочи.
Нельзя замораживать пробу мочи!

Референсные значения: отрицательно.

Отрицательный результат

Хламидийная инфекция отсутствует. Воспаление вызвано другим возбудителем.
Положительный результат

Хламидийная инфекция присутствует. Если есть воспаление, то оно, вероятно, вызвано хламидиями. В этом случае содержание ДНК в пробе высокое.
Хламидии присутствуют, однако воспаление может быть вызвано другим возбудителем. В этом случае ДНК хламидий выявлена в небольшом количестве.