Хламидия (Chlamydia trachomatis), качественное определение ДНК в отделяемом конъюнктивы глаз или в мазке из ротоглотки

Chlamydia trachomatis (хламидия трахоматис) – бактерия, внутриклеточный паразит, возбудитель нескольких заболеваний человека. В частности, некоторые серовары этого вида вызывают трахому и венерическую лимфогранулему. В России наиболее распространена хламидийная инфекция мочеполовой системы (урогенитальный хламидиоз). Она передается половым путем, а также от матери к ребенку при родах. Возможен и контактно-бытовой путь передачи. Chlamydia trachomatis – самый частый возбудитель негонококкового уретрита. У женщин хламидиоз встречается чаще, чем у мужчин.

Инкубационный период составляет от 2 недель до 1 месяца. Часто (примерно в половине случаев) хламидиоз протекает бессимптомно.

Начальные симптомы инфекции: жжение и боль при мочеиспускании, слизистые выделения, помутнение мочи, слабость, немного повышенная температура, у мужчин – воспаление мочеиспускательного канала, которое длится долгое время, у женщин – слизистые или гнойные выделения из влагалища. В дальнейшем могут возникать различные осложнения: эпидидимит, эндометрит, конъюнктивит, артрит и др.

Считается, что хламидийная инфекция опасна при беременности, так как может привести к преждевременным родам, выкидышу, сниженному весу новорождённых и даже гибели плода.

Кроме того, новорождённый ребенок иногда заражается хламидиозом от матери при прохождении через родовой канал, из-за чего у него развивается конъюнктивит либо пневмония.

Для анализа на хламидии и диагностики хламидиоза применяют серологические методы (например, ИФА), посев хламидий, а также выявление ДНК бактерий (например, ПЦР).

У серологических методов и посева есть ряд ограничений, так что тесты на основе ПЦР считаются самыми удобными и чувствительными.

ПЦР в реальном времени (РТ-ПЦР) – это лабораторный метод, который позволяет найти в пробе ДНК возбудителя: если в образце присутствует Chlamydia trachomatis, то реал-тайм ПЦР обнаружит ДНК этой бактерии. Принцип заключается в том, что ДНК возбудителя, которого хотят выявить, много раз копируется с помощью специальных ферментов (ДНК-полимераз). Обычно проходит несколько десятков циклов и в ходе каждого нужная ДНК удваивается. В результате количество исследуемой ДНК увеличивается в миллионы раз и ее можно детектировать с помощью флуоресцентного красителя.

При ПЦР в реальном времени количество ДНК выявляется в процессе копирования, после каждого цикла. Но при этом с помощью РТ-ПЦР нельзя различить формы инфекции (например, свежеприобретенное или давнее заражение).

Для чего используется ПЦР-анализ на хламидии?

Для диагностики инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis (хламидия трахоматис), и мониторинга ее лечения.
Когда назначается исследование?

Для диагностики урогенитального хламидиоза при следующих симптамах:
жжение и боль при мочеиспускании,
покраснение в области наружного отверстия уретры у мужчин,
слизистые выделения из половых путей,
помутнение мочи,
слабость,
субфебрильная температура.
Для исключения хламидиоза при планировании беременности (и во время нее).
После случайных половых контактов.
Если половой партнер заражен хламидиями.

Важное место занимает подготовка к исследованию. Чтобы результат анализа был максимально достоверен, взятие мазка из ротоглотки производится в следующих условиях:

Натощак (или не ранее, чем через 2-3 часа после приема пищи).
Перед полосканием, орошением слизистой оболочки, применением капель или рассасыванием таблеток.
До назначения антибактериальных препаратов (или не ранее, чем через трое суток после их отмены).
С исключением чистки зубов, жевания резинки, питья воды, интенсивного высмаркивания и пользования гигиеническими средствами (крема, мази). Перед анализом отделяемого с конъюнктивы глаза нельзя умываться и использовать косметические средства. Как правило, мазок сдается с утра. Если человек пользуется глазными каплями, то следует учесть, что применять их нужно не позднее чем за сутки до визита к врачу-офтальмологу. Также если пациент принимает антибиотики или противовоспалительные средства необходимо сообщить об этом врачу, который будет проводить исследование.

Референсные значения: отрицательно.

Отрицательный результат

Хламидийная инфекция отсутствует. Воспаление вызвано другим возбудителем.
Положительный результат

Хламидийная инфекция присутствует. Если есть воспаление, то оно, вероятно, вызвано хламидиями. В этом случае содержание ДНК в пробе высокое.
Хламидии присутствуют, однако воспаление может быть вызвано другим возбудителем. В этом случае ДНК хламидий выявлена в небольшом количестве.