Бактериальный вагиноз (Gardnerella vaginalis/ Lactobacillus sp/ Atopobium vaginae/ количество клеток), количественное определение ДНК

Бактериальный вагиноз является патологическим процессом, возникающим преимущественно у женщин репродуктивного возраста и характеризующимся изменением состава и соотношения микрофлоры влагалища. Он является частой причиной патологических выделений, может быть ассоциирован с развитием воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин и усиливает риск заражения инфекциями, передающимися половым путем. Развитие бактериального вагиноза также повышает риск развития патологий беременности: преждевременных родов, самопроизвольных абортов, низкого веса ребенка при рождении, развития послеродового эндометрита, вагинита. Следует отметить, что у 50 % женщин бактериальный вагиноз может иметь бессимптомное течение.

У здоровых женщин репродуктивного возраста общее количество микроорганизмов в вагинальном отделяемом составляет 107-109 КОЕ/мл (колониеобразующих единиц на миллилитр) и состоит из более чем 40 разнообразных видов. Преобладают палочки Додерляйна, лактобациллы (Lactobacillus spp.): L. crispatus, L. jensenii, L. acidophilus, L. brevis. Они поддерживают постоянство биохимического состава и обладают защитной функцией. Лактобациллы обладают способностью перерабатывать гликоген в молочную кислоту, продуцировать пероксид водорода, что позволяет поддерживать постоянство рН влагалища, снижая кислотность. При этом подавляется рост условно-патогенной микрофлоры. При бактериальном вагинозе отмечается дисбиоз, нарушение соотношения и увеличение роста условно-патогенных, факультативно-анаэробных, анаэробных бактерий и микоплазм. К таким микроорганизмам относятся Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae, Prevotella spp., Mobiluncus spp., Ureaplasma spp. и ряд других. Снижение количества лактобактерий и избыточный рост условно-патогенных микроорганизмов приводит к нарушениям, которые могут клинически проявиться воспалением стенок влагалища – вагинитом, сопровождающимся выраженным зудом, жжением, аномальными выделениями.

Наиболее часто при бактериальном вагинозе увеличивается количество микроорганизмов: Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae. Gardnerella vaginalis относится к условно-патогенной микрофлоре влагалища, является факультативным анаэробом. Микроорганизмы выявляются у 95-99 % женщин с бактериальным вагинозом, в том числе при его рецидивирующем течении. Чрезмерное размножение гарднерелл приводит к вытеснению преобладающих во влагалище при норме Lactobacillus spp. и стимулирует избыточный рост анаэробных бактерий и микоплазм. Риск развития гарднереллеза увеличивают вагинальные спринцевания, использование внутриматочных контрацептивов и спиралей, хламидийная или гонококковая инфекция и т.д. Бактерия Atopobium vaginae является грамположительной анаэробной палочкой, выявляющейся у 99-100 % пациентов с бактериальным вагинозом. Она играет роль в развитии воспалительных заболеваний органов малого таза у женщин, часто обнаруживается при рецидивирующем бактериальном вагинозе. Обнаружение данных микроорганизмов играет важную роль в своевременной диагностике бактериального вагиноза, в том числе при его бессимптомном течении, предотвращении развития осложнений, а также в назначении правильной патогенетической терапии.

Диагностика бактериального вагиноза основана на сочетании клинических проявлений и данных лабораторного обследования. В лабораторной диагностике является важным определение видового состава микрофлоры влагалища и определение соотношения микроорганизмов. При этом определяется количество бактерий Lactobacillus spp. и других микроорганизмов.

К современным методам диагностики относится метод полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РТ-ПЦР). Это метод молекулярной диагностики, позволяющий выявлять генетический материал исследуемого возбудителя. Он характеризуется высокими показателями диагностической чувствительности и специфичности, быстротой получения конечного результата. Особенностью метода является возможность выявлять ДНК (дезоксирибонуклеиновую кислоту) вируса даже при малом содержании её в исследуемом биологическом материале. Метод основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. При этом производится количественная оценка ДНК Bacteria (общее количество бактерий), Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae с анализом соотношения концентраций этих микроорганизмов. Метод применяется для диагностики бактериального вагиноза, в том числе при его бессимптомном течении, у женщин с патологиями беременности, с развитием воспалительных осложнений после беременности, а также при назначении и контроле проводимой терапии. При оценке результатов РТ-ПЦР выявляются фрагменты ДНК как живых, так и разрушенных микроорганизмов, поэтому результат исследования будет оставаться положительным еще в течение некоторого времени, даже если лечение было подобрано правильно.

Для чего используется исследование?

Для количественного выявления ДНК возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.
Для определения соотношения количества ДНК возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.
Для диагностики этиологии бактериального вагиноза и его осложнений.
Для назначения патогенетической терапии бактериального вагиноза и для оценки контроля проводимого лечения.
Когда назначается исследование?

При клинических проявлениях бактериального вагиноза (патологические выделения из влагалища, зуд, жжение), а также при его бессимптомном течении.
При развитии осложнений бактериального вагиноза, патологии беременности: преждевременные роды, самопроизвольные аборты, низкий вес ребенка при рождении, развитие послеродового эндометрита, вагинита.
При назначении и контроле проводимой терапии бактериального вагиноза.

Требования к подготовке перед взятием биологического материала
Не следует брать материал для исследования ранее, чем через 24 часа после полового акта.
Не следует брать материал для исследования ранее, чем через 24 часа после УЗИ с
применением вагинального датчика.
Не следует брать материал для исследования ранее, чем через 24-48 часов после
кольпоскопии.
Не рекомендуется брать материал во время менструального кровотечения.
Не рекомендуется выполнять спринцевание накануне и в день взятия биологического
материала.
Рекомендуется брать материал не ранее, чем через 10 дней после применения
антибактериальных препаратов и местных антисептиков, и не ранее, чем через 1 месяц после
применения антибиотиков перорально.
Обследование женщин целесообразно проводить в первую половину менструального цикла,
не ранее 5-ого дня. Допустимо обследование во второй половине цикла, не позднее, чем за 5 дней до
предполагаемого начала менструации. При наличии выраженных симптомов воспаления взятие
материала проводится в день обращения.
Пациенту рекомендуется воздержаться от мочеиспускания в течение 1,5-3 часов перед взятием
соскоба из уретры (женщинам – 3 часа, мужчинам – 1,5-2 часа). Требуется предварительная запись к урологу для забора биоматериала.

Референсные значения

ДНК Bacteria: более или равно 10^6 ГЭ/мл.

ДНК Lactobacillus: не менее концентрации ДНК Bacteria.

ДНК Gardnerellavaginalis: не превышает концентрацию ДНК Lactobacillus.

ДНК Atopobiumvaginae: не превышает концентрацию ДНК Lactobacillus.

Результаты выдаются с заключением врача.

Причины повышения:

наличие ДНК микроорганизмов Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae;
бактериальный вагиноз, вызванный нарушением соотношения возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.
Причины понижения:

отсутствие бактериального вагиноза, вызванного нарушением соотношения возбудителей Lactobacillus spp., Gardnerella vaginalis, Atopobium vaginae.